定制抗体的产生可以通过使用两种主要方法之一来完成: 全长蛋白质和短肽，但合成肽抗原通常太小而不能自己产生显着的免疫应答。为了克服瓶颈，合成肽与更大的载体蛋白偶联，其含有许多表位有助于刺激 T 细胞并诱导 B 细胞应答。一些最常见的载体蛋白包括: 

KLH钥匙孔帽状血蓝蛋白：

KLH 是一种大的聚集蛋白，其分子量范围为4 * 105-1 * 107Da。KLH 的一个优点是它不会干扰 ELISA 或西方墨点法实验，因为它不会被用作封闭试剂。此外，与牛血清白蛋白相比，KLH 具有较高的免疫原性。如图1所示，PEG 和 PCB 与5种不同的蛋白质结合: 鼠血清白蛋白(MSA) ，BSA，KLH，β-葡萄糖苷酶或 OVA，KLH 在哺乳动物宿主中显示出极高的免疫原性。由于其大小和结构，在 KLH 水中的溶解度是有限的，使溶液和混合物呈现混浊的外观。然而，这并不影响免疫原性，混浊的溶液可用于免疫接种。 

图一。四周 SC 后蛋白质特异性 IgM (a)和 IgG (b)滴度。通过 ELISA 测试，测量了皮下注射的 c57BL/6J 小鼠的 MSA、 BSA、 OVA、 β-葡萄糖苷酶和 KLH。C)用于结合的蛋白质和聚合物的说明性方案(Li，Bowen，et al。)

BSA牛血清白蛋白(牛血清白蛋白)

牛血清白蛋白(BSA)是一种来源于牛的血浆蛋白，分子量为7 × 104Da。因为 BSA 比 KLH 小，所以它比 KLH 更易溶于水。然而，牛血清白蛋白的缺点是在许多实验中被用作阻断缓冲试剂。如果在基于抗体的检测中使用针对肽 -BSA 偶联物的抗血清，假阳性是常见的，因为所使用的血清也含有针对 BSA 的抗体。

OVA (Ovalbumin)卵清蛋白

卵清蛋白(OVA)是蛋清中含量最丰富的蛋白质，其分子量为4.5 × 104Da。它经常被用作第二载体蛋白，以确认抗体是特异性的肽，而不是载体蛋白，如牛血清白蛋白。

上述载体蛋白可以与 N 端、 C 端或内部残基上的肽缀合。我们建议将载体蛋白结合到肽的 N 端或 C 端，以便向宿主免疫系统提供尽可能多的氨基酸测序。一种常见的接合方法是马来酰亚胺法，它将肽的半胱氨酸残基与载体蛋白偶联。对于没有半胱氨酸残基的肽，将一个半胱氨酸残基添加到肽的 N- 或 C- 末端，以便它可以连接到载体蛋白。作为一般指南，如果肽来源于蛋白质的 N 端，那么与载体蛋白偶联应该在 C 端，相反，载体蛋白被添加到肽的 N 端。如果肽来自蛋白质的内部，则载体蛋白与肽的 N- 或 C- 末端结合。 

这里是一个总结，KLH 是首选的免疫原在许多情况下的免疫。当考虑成本时，通常选择 BSA 或 OVA。牛血清白蛋白具有高度的非特异性结合，是免疫分析捕获抗原的理想选择，而 OVA 已被用于免疫原和捕获抗原。

此外，为了产生免疫应答或高质量的多克隆抗体，关键步骤之一是设计最佳的合成肽抗原。尝试优化抗原设计工具，选择最好的抗原。如果您有关于肽结合或合成肽抗原的问题，请与我们联系：tubenirvana.net，18918283397微信同号